Пэтч-клемпинг и различные электрофизиологические исследования

Электрофизиология

Двухфотонная визуализация Ca²⁺ и сбор электрофизиологических данных являются превосходными инструментами для изучения нервных клеток и их сетевой активности. Используя два метода одновременно, можно отслеживать потенциальные флуктуации и связывать их с изменениями уровня Ca²⁺. Тогда, как метод двухфотонной визуализации Ca²⁺ показывает события в нескольких небольших областях (различимые части дендритов и шипиков) с высоким пространственным разрешением (менее 1 мкм), но с низким временным разрешением (> 100 мс), электрофизиология может охватывать изменения на более крупных участках (клетки или обширные области) с низким пространственным разрешением (≈ 150 мкм), но значительно быстрее (< 1 мс).

Дендритный пэтч-клемпинг

С помощью внутриклеточной записи методом пэтч-клемпинга можно наблюдать и управлять колебаниями мембранного потенциала в нейронах. Все микроскопы Femtonics могут быть оснащены электрофизиологическим устройством, облегчающим эксперименты:

автоматический модуль программного обеспечения для перемещения наконечника пипетки в выбранное место дендрита
перемещение пипетки и расстояние до желаемого местоположения можно отслеживать в режиме реального времени
направляющие точки могут быть расположены пользователем в соответствии с отсканированными переданными или двухфотонными изображениями
передаваемые в реальном времени ИК и двухфотонные изображения могут отображаться отдельно или при наложении друг на друга
перед использованием новой пипетки требуется только один простой шаг для калибровки

Обработка электрофизиологических данных

Модуль программного обеспечения получает электрофизиологические сигналы, используя аналого-цифровые преобразователи микроскопа. Функция телеграфирования передает параметры преобразования от усилителя к аналого-цифровым преобразователям, управляемым программным обеспечением. Время сбора электрофизиологического сигнала совпадает с данными визуализации. Графический интерфейс управления электрофизиологией также включает в себя функцию проверки герметичности.

Двойная перфузионная камера

Данная камера предназначена для поддержания изолированных живых тканей в здоровом состоянии во время экспериментов. В отличие от одиночной перфузии, двойная перфузия погруженных слоев повышает жизнеспособность клеток, поскольку кислород, как и другие материалы, может свободно и эффективно диффундировать с высокой скоростью потока с обеих сторон в толстые слои.