Сканирование дендритов

Дендриты и дендритные шипики состоят из тонких, слабых и уязвимых отростков, поэтому их трудно изучать. Однако, используя двухфотонную лазерную микроскопию, мы можем собирать сигналы от фемтолитровых объемов более глубоких областей мозга, одновременно избегая фототоксических реакций. Кроме того, пространственно ограниченное сканирование аксонов, дендритов и шипиков в областях интереса позволяет обнаруживать даже подпороговые сигналы с высоким отношением сигнал/шум. Доступно несколько конфигураций, с помощью которых можно визуализировать дендритное наслоение и выполнять функциональные измерения в условиях in vivo и in vitro.

Быстрое сканирование в 2D

Режим анализа: многострочное сканирование в модификации FEMTOSmart Galvo

Адаптивные зеркала X и Y гальванометрического сканера микроскопа FEMTOSmart Galvo в сочетании со специальными электронными платами от компании Femtonics позволяют с высокой точностью воспроизводить извилистую траекторию, характерную для выступов дендритной ветви, используя метод многострочного сканирования. Ограничивая область сканирования интересующими дендритными сегментами, несущими шипики, и пропуская пространство между ними, можно увеличить как скорость сканирования (до 2 кГц), так и отношением сигнал/шум. Данный режим сканирования является экономически эффективным альтернативным решением по сравнению с методами сканирования, основанными на акустооптическом сканировании.

Визуализация дендритов и шипиков с коррекцией движения

Режим анализа: покадровое сканирование по изогнутой траектории в модификации FEMTOSmart Galvo

С помощью покадрового сканирования по изогнутым траекториям можно отобразить область вдоль предварительно выбранной линии. Выбранные области могут принимать различные формы, от областей вдоль прямых линий до сложных изогнутых кривых. Этот продвинутый метод сканирования полезен для отслеживания событий вдоль изогнутых дендритов с шипиками, а также может быть полезен для измерения дендритов в поведенческих моделях животных, где артефакты движения являются распространенной проблемой. С помощью управляющего программного обеспечения движение корректируется в автономном режиме, пока дендрит остается в области анализа.

Трехмерная визуализация дендрита

Режим анализа: трехмерное сканирование по траектории в модификации FEMTOSmart Galvo с объективом с пьезо-позиционером

Микроскопы с гальваносканером, оснащенные пьезо-позиционером и программным плагином RollerCoaster, поддерживают сканирование по 3D траектории, что позволяет пользователю следить за древовидным разветвлением нервных клеток в трехмерном пространстве. Этот улучшенный режим сканирования позволяет собирать сигналы из областей, например, в 25 мкм с частотой сканирования 150 Гц, что достаточно быстро для отслеживания изменений уровня Ca²⁺ и анализа биологической функциональности в трехмерном пространстве.